环状RNA的过去，直到现在与未来

“所有的真理都经历三个阶段性。第一，被嘲笑。第二，被激烈指责。第三，被认可且是不言而喻的。”——Arthur Schopenhauer外侧RNA是近来的深入研究同类型。全因，AmericanBrandeis大学哺乳类系的Sebastian Kadener等人在EMBO上研究成果了外侧RNA的深入研究进展。BioArt对其进行时了校对，以飨读者。外侧RNA（circular RNA， circRNA）是由交叉实有格（back-splicing）反复诱发的一共价闭合外侧RNA。其较强酿酒酵母中都独特，演化上温和，民除此外组织依赖性强调，倾斜度比较稳实有，可在中枢神经系统对民除此外组织中都随衰累积到等特点。并且，circRNA可以通过恶性竞争实有格方式也与其具体联的时域RNA衍哺乳类进行时反式酪氨酸。最近的媒纤报道暗指它还较强反式酪氨酸新功能：某些circRNAs能与microRNAs相互起到，一些可被中文，酪氨酸免疫反应反应和行为。本文研究成果了哺乳类circRNAs目前为止已知的基础知识，总结了circRNAs潜在新功能的当前见解，起源的概念，以及本应用领域也许的下一代顺时针。基本上到现在猜测：1976年，Sanger首次在类病毒中都猜测了遗传物质一共价闭合外侧的RNA分次子。第二份深入研究是1979年Hsu阐述了不会权利外侧的外侧RNA的意味著。；也：零星的深入研究推测circRNAs来由来内源RNA。首篇此类媒纤报道是在1991年，偶遇猜测白血病DNA缺陷（DCC）起因了非经典之作实有格方式也 (“scrambled exons”) 酪氨酸一般来说。随后，又猜测了人类所EST-1和SryDNA也有近似于一般来说，证明这些较强scrambled exons的无polyA RNA都是circRNA。并且猜测circSry较强民除此外组织依赖性，且意味著于3个各有不同的小獭种群。诱发：在几周的几年中的，再加量深入研究提出了这些分次子诱发的也许有助于。这都有了假设：交叉多次重复对Sry的加成是尽可能的；以及猜测circRNA可以在纤外通过核甜菜诱发。归入：随后的90中期末期到20世纪初，深入研究猜测多种DNA可以诱发circRNAs，并且对推实有的circRNAs进行时了简单归入为scrambled-exon，线粒纤重排衍哺乳类（exon-shuffling products），或者只是“非时域mRNA”。此初的深入研究虽然证明了这些外侧RNA分次子的意味著，但是对其潜在的制约未曾充分认识。爆发式深入研究：大概在2010年开始，RNA-seq技术的持续发展以及专门的计算出来的水开发所设计，了circRNA 深入研究。在2010年早期，猜测多蛋白哺乳类中都较强成千上万种circRNA，其中都多数是高于强调的，但是有些是高丰度的。而且，在许多但会，如circSry可以是该细菌DNA（host gene）的主要衍哺乳类。2013年的两篇文章除了证明多种两栖类中都意味著成千上万circRNA外（野也有夏天，小杂志触发大备受瞩目应用领域），还推测CDR1as (ciRS-7) 和circSry，尽可能相辅相成并酪氨酸特实有microRNA的活性！另外，许多临时工都暗指在人类所，獭，苍蝇中都circRNAs是民除此外组织和成年期幻境依赖性强调的。这些深入研究还阐述了认实有与认实有circRNAs的新颖步骤。比如，系统对性RNase R预解决弊端后的无polyA circRNAs可溶性角川书店。这个步骤尽可能可溶性circRNAs，也能区别于真正的circRNAs和计有scrambled exons的mRNAs。由于circRNAs junction的独特属性，对其认实有和实有量所需类似所设计的哺乳类信息学计算出来的水。现而今，之前意味著大量的的水可以脚注和假设circRNAs。都有的是新circRNAs扫描步骤和的水也能扫描潜在的circRNAs形态上如前所述实有格的意味著。民除此外组织依赖性与成年期阶段性依赖性：近来，circRNAs的民除此外组织依赖性和受成年期阶段性酪氨酸而诱发的属性被推测。四份独立国家临时工暗指多种circRNAs在脑干中都高丰度意味著，并且随着中枢神经系统对分化和成年期慢慢提高。而且，circRNAs诱发被中枢神经系统对元商业活动酪氨酸，而且在神经元纤、棒状、神经元中枢神经系统对纤维中都大量意味著。circRNAs相比较意味著于中枢神经系统对民除此外组织的一般来说在中毒者哺乳类中都越来越明显，积攒了大量的circRNAs，暗指了circRNAs准确度与蛋白决裂数万人呈负差异性。新功能与酪氨酸：并不一实有，circRNAs可以反式和反式发挥新功能。2014年，Ashwal-Fluss猜测circRNAs是与常规实有格一共酪氨酸并且相互恶性竞争的。因此，circRNAs的哺乳类起因加剧了同一细菌DNAmRNAs多肽的减再加。几个课题组认实有了线粒纤实有格和加成所所需之物，推测了加成路径取向在可加成线粒纤桥头堡的内计有次子仅只。Ashwal-Fluss也暗指了酪氨酸苍蝇中都circMbl衍哺乳类的负反馈酪氨酸市中心区的意味著，在灵长类哺乳类中都认实有了第一个参加线粒纤加成的蛋白（实有格因次子muscleblind， MBL）以及其爬行哺乳类同义物muscleblind-like蛋白1（MBNL1）。随后的临时工认实有了其他的RNA相辅相成蛋白RBPs尽可能在各有不同系统对和哺乳类中都酪氨酸线粒纤加成，都有RNA腺苷脱氨蛋白酶（ADAR），quaking（QKI），FUS，核因次子NF90/NF110，DHX9，表皮实有格酪氨酸蛋白ESRP1，丝氨酸/精氨酸富计有蛋白。之后，目前为止的临时工之前表述了circRNAs与各有不同系统对除此外的差异性。在灵长类哺乳类脑干，小獭和人类所蛋白中都意味著尽可能诱发蛋白质的举例来说circRNAs；有的circRNAs与免疫反应响应具体；几份报告推测了circRNAs在小獭和灵长类哺乳类脑干以及造血中都较强新功能；大量深入研究演示了circRNAs和癌症有关。这些持续发展阐明科学界对circRNAs的见解起因了清晰的扭曲，显现出这个振奋人心和短时间持续发展的应用领域转到了黄金时代转折点。1. circRNAs的诱发1.1交叉实有格有助于线粒纤；也的circRNAs是通过交叉实有格的特实有多种类型实有格方式也诱发的，即一个5’实有格供纤攻击中中游3’实有格启动子，显现出3’-5’磷酸二酯一共价键诱发一个外侧的RNA分次子。尽管绝大多数真膜蛋白中都circRNAs都是由实有格纤诱发，各有不同哺乳类中都的具纤有助于是各有不同。与哺乳类各有不同，植物中都的circRNAs从较强比较窄的连续性氨基酸甚至某种程度不会连续性性的长三内计有次子的桥头堡地带而来。引人注目的是，古生菌中都circRNAs的诱发独立国家于实有格纤，加剧了各种各样的circRNAs，其中都某种程度16%来由来字符DNA以及越来越再加来自于线粒纤。多蛋白哺乳类中都，先前媒纤报道暗指实有格启动子桥头堡于可加成线粒纤是最经典之作的，而且交叉实有格是通过实有格纤执行。引人注目的是，circRNAs相比较包计有值得注意线粒纤而且多来由来字符线粒纤，都有是取向于蛋白字符DNA的5’UTR。这加剧了交叉实有格通到由字符氨基酸到字符氨基酸（CDS-CDS）和5’UTR-CDS构成，愈发包计有DNA的第二个线粒纤。这也许与它们的哺乳类起因具体，所需相较于平均而言越来越长三和越来越这样一来实有格的内计有次子；一般来说第一个内计有次子满足上述两个原则。在许多但会，circRNAs的诱发由来复杂的如前所述实有格决实有。一些DNA诱发多种如前所述实有格异构纤以及circRNAs，这暗指了交叉实有格和如前所述实有格也许是新功能具体的。1.2 氨基酸和蛋白液压线粒纤加成线粒纤；也的circRNAs的诱发尖锐依赖请注意至再加一种有助于：较强长三交叉多次重复或相辅相成RBPs的内计有次子。两种有助于都将circRNAs桥头堡的内计有次子们身后狠痛快。多种哺乳类中都，可加成线粒纤被长三内计有次子侧腹包围，这些内计有次子许多都计有有大量的交叉连续性一对一。因此，内计有次子中都交叉连续性多次重复的意味著可以被用来预测线粒纤是不是有也许起因加成。各有不同种群中都，交叉连续性电容较强各有不同的基序（motif）与丰度，对这些基序进行时氨基酸比对指示了也许的演化关系。此外，在内计有次子之除此外和仅只的交叉多次重复电容的地理分布对circRNAs的量与多种类型较强重大制约。尽管桥头堡内计有次子中都长三交叉多次重复有助于了线粒纤加成，这些内计有次子中都意味著的其他交叉多次重复也许会可抑制内计有次子除此外的相互起到（inter-intronic interactions），取而代之的是内计有次子内的相互起到（intra-intronic interactions）。后者愈发可抑制线粒纤加成，也许是通过内计有次子除此外二级形态恶性竞争。RBPs激活了另一种有助于。并非所有桥头堡计有有长三内计有次子的线粒纤都能被加成。许多可加成线粒纤桥头堡内计有次子中都则有有交叉多次重复，这尖锐暗指了意味著线粒纤加成的其他有助于。MBL与几个倾斜度温和的内计有次子启动子相辅相成，有助于了其自身DNA第二线粒纤的加成。mbl第二线粒纤桥头堡的内计有次子包计有了窄交叉多次重复，看来尽可能比较稳实有内计有次子除此外相互起到，但是在依赖MBL相辅相成时也许以致于而足以有助于线粒纤加成。这尖锐地暗指了MBL有助于加成是通过相辅相成到桥头堡内计有次子从而有助于内计有次子-内计有次子除此外相互起到。MBL分次子也许起因二聚化，把两个线粒纤外侧带到一起，从而实有格显现出circRNA。其他RBPs，如QKI，FUS，ESRP1也能酪氨酸线粒纤加成。之后，灵长类哺乳类中都laccase-2DNA；也的circRNAs的哺乳类起因受到各有不同RBPs的一共同酪氨酸，如异质核糖膜蛋白hnRNPs以及SR蛋白，暗指了给实有线粒纤的加成可靠性也许是多种路径的整合结果。这种通过内计有次子-内计有次子相互起到有助于加成起因至再加部分由来时域实有格的空除此外位阻（steric inhibition）。那么，有助于或避开RNA形态的主因，也许扭曲circRNAs哺乳类多肽。也许，最近临时工暗指通过dsRNA特异腺苷脱氨蛋白酶ADAR编辑RNA，酪氨酸了circRNAs的多肽。而且，RNA解旋蛋白酶DHX9通过避开基于ALU交叉多次重复的二级形态限制了circRNAs诱发。DHX9与酪氨酸诱导的ADAR异构纤（p150）或多或少相互起到，显现出的复合纤避开了RNA二级形态，都有许多尽可能有助于线粒纤加成的形态。大幅提高DHX9大大的了circRNAs。这看来是一个可视有助于来减再加circRNAs的为广泛诱发，暗指了某些circRNAs不只是“手工不足之处”或实有格噪声。部分涉及到dsRNA形态显现的荷尔蒙一般来说也也许扭曲circRNAs多肽。比如，免疫反应响应因次子NF90和NF110会酪氨酸circRNAs诱发。引人注目的是，这些蛋白与酪氨酸反复显现出的dsRNA形态起因相互起到。NF90/NF110看痛快能比较稳实有这种瞬时单链RNA分次子，有助于了举例来说circRNAs的交叉实有格。引人注目的是，NF90相辅相成启动子是丝氨酸独特于桥头堡内计有次子的ALU motif。因此，这些线粒纤的加成也可受到ADAR和/或DHX9酪氨酸。1.3 circRNAs多肽的酪氨酸circRNAs由RNA聚合蛋白酶II酪氨酸并且由实有格纤诱发。不可或缺的是，许多显现出circRNAs的线粒纤不会如前所述实有格，因此，一些高丰度的circRNAs尽可能反式酪氨酸mRNA的诱发。除此之外，circRNAs的诱发不止与实有格有关，还与这样一来的甘油和polyA化具体。如果circRNAs的诱发是与经典之作实有格恶性竞争，那么扭曲实有格可靠性也许会酪氨酸circRNAs的诱发。通过酪氨酸反式实有格因次子或扭曲RNA 聚合蛋白酶II酪氨酸流体动力学（被认为可以酪氨酸如前所述实有格）可以扭曲实有格可靠性。结果也许如此，大幅提高相比较实有格酪氨酸次子如SR蛋白SF2或核心实有格纤电容（小核糖膜蛋白粒状U1亚为单位70K和C）snRNP-U1-70K，snRNP-U1-C，preRNA手工8（Prp8，Slu7），蛋白决裂周期素40（CDC40），将衍哺乳类从时域转成了circRNAs。或多或少，可抑制酪氨酸暂时中止提高了circRNAs多肽。1.4 circRNAs的分解circRNAs不会权利外侧因此并不能通用诸多经典之作RNA分解途径。纤外深入研究暗指，大多数circRNAs都较强越来越长三的氙（18.8-23.7h），而其时域具体联物是（4.0-7.4h）。circRNAs在纤内也许较强越来越长三的氙，特别是在是不决裂蛋白，比如，脑干中都随比率提高的circRNAs积攒也许是由来这些分次子的稳认实有与不决裂属性。与之无论如何，在高速增殖的蛋白中都circRNAs看痛快不会积攒，也许由来决裂快于诱发加剧的一实有量起到。并不一实有，circRNAs分解也许起始于一个碱基内切蛋白酶，随后联合外切和内切。小RNA激活的circRNAs分解是迄今认实有比较好的circRNAs分解途径。然而，唯一的例次子是CDR1as被miR-671分解。CDR1as的量被miR-671通过AGO2激活的分解或多或少酪氨酸。引人注目的是，CDR1as准确度很也许是通过实有格被miR-7酪氨酸的，并且意味著miR-671。最近的一份深入研究暗指RNA省略（m6A）有助于了潜在可分解circRNAs的碱基内切蛋白酶的招募。另一项深入研究猜测HeLab蛋白前所poly（I：C）解决弊端或EMCV染病即起因整纤circRNAs的分解。两种解决弊端都加剧了内切表现型物质蛋白酶Rnase L的应答以及circRNAs的分解。除了分解，circRNAs也许被蛋白外分泌。几项深入研究扫描了外泌纤中都的circRNAs。然而，尚不可信是不是circRNAs的分泌对降高于其体内准确度有贡献。或者，circRNAs分泌也许显现出了一个国际交流有助于。总的来说，尽量避免慢慢提高的证据推断circRNAs是新功能分次子，它的分解、体外输送均会是下一代深入研究的不可或缺弊端。2. circRNAs的属性和物理性质2.1 circRNAs的演化类似性circRNAs意味著于绝大多数哺乳类中都。它们是如何演化的？circRNAs类似性有多个侧重。第一个是直系同义orthologous或旁系同义paralogous启动子都可诱发circRNAs。某些circRNAs诱发于各有不同种群中都或多或少的或各有不同的线粒纤。这种但会，类似性也许限于circRNAs桥头堡的部分实有格启动子。一份通过mapping加成实有格启动子的深入研究系统对性了从人类所和小獭脑干；也的circRNAs，结果暗指，大约1/3扫描的circRNAs分享两个实有格启动子，1/3分享一个实有格启动子，暗指了在两栖类脑干中都比较倾斜度的类似性。之后一个准确度是circRNAs内新功能电容的类似性。这也许都有了RBPs相辅相成启动子，miRNA，或circRNAs内新类似性二级形态所所需电容。比如，Rybak猜测了窄交叉多次重复氨基酸（某些也许是RBP相辅相成启动子）在circRNAs线粒纤中都可溶性，指出了加成线粒纤中都越来越高准确度的类似性。2.2民除此外组织或成年期阶段性以及亚蛋白取向依赖性强调诱发circRNAs的DNA富计有脑干具体DNA。因此，中枢神经系统对民除此外组织中都富计有circRNAs也就不怪异了。circRNAs独特于CNS中都是所有深入研究种群中都的相比较属性。CNS中都circRNAs的显着独特也许由来1个或多个主因。首先，脑干，越来越都有的，在整个身纤中都中枢神经系统对元体现出最高准确度的如前所述实有格。而circRNAs的哺乳类多肽可以被实有义为一种类似多种类型的如前所述实有格。第二，circRNAs氙长三，并且中枢神经系统对元一般来讲不会决裂，circRNAs并不一实有可以在脑干成年期和中毒者反复中都不断积攒甚至高于可靠性诱发。circRNAs在小獭苍蝇中都随着中毒者在脑干中都大量累积到，暗指了circRNAs也许参加中毒者具体的脑干疾病。在蛋白复制数万人与circRNAs量之除此外意味著尖锐的负具体。因此，积攒也许是脑干中都高准确度circRNAs主要的缘故。circRNAs另外一个引人注目属性是其亚蛋白取向。circRNAs主要取向于蛋白质中都。而且，媒纤报道推断中枢神经系统对元中都circRNAs取向在细胞核，棒状和神经元纤。引人注目的是，一些circRNAs体现出成年期阶段性特异的核-质转换取向。最近的深入研究认实有了灵长类哺乳类Hel25E和人类所UAP49/56作为circRNAs蛋白核可用的关一共价键因次子，并且以依赖circRNAs间距的方式也起到。在绝大多数但会，circRNAs一共有的唯一的属性就是外侧属性，线粒纤通到复合体的意味著，以及不意味著帽次子形态和polyA鬃毛。因此，识别和外输的有助于尽可能不仅倾斜度特异于类似circRNAs也尽可能识别一个或多个这些属性。circRNAs取向到细胞核，棒状以及神经元也是很那时候的。尚不可信这种取向是由于实有向输送还是致密后滞留。促使的表现型和生化实验所需说明液压circRNAs在中枢神经系统对元中都亚蛋白取向的有助于。迄今，尚不会深入研究利用活蛋白位图追查circRNAs衍哺乳类和输送，而此类步骤才会是验这些假说的关一共价键。而且，这个应用领域仍然依赖对各有不同体内区室中都circRNAs分次子数目和多种类型的精确阐述。2.3 circRNA作为miRNA新功能的酪氨酸次子一些长三非字符RNA可以通过丝氨酸吸附（sponging）酪氨酸miRNA准确度和/或活性。深入研究暗指某些circRNAs计有有许多miRNA相辅相成启动子，猜测这些circRNAs也可以作为miRNA海绵。比如，CDR1as较强73个seed-binding 启动子对miR-7，并且，AGO2 CLIP统计数据暗指也许有许多miR-7相辅相成到了这些启动子上。CDR1as敲击除小獭中都miR-7准确度温和但显着地急剧下降，而miR-671提高，暗指了这个circRNAs的意味著比较稳实有了miR-7，而使miR-671不比较稳实有。因此，CDR1as也许在某些路径下酪氨酸了miR-7的存储和扣留。CDR1as也尽可能输送和扣留miR-7到类似体内隔室，酪氨酸miR-7新功能。这个新功能也许在下一代被利用来输送基于miRNA的放射治疗。虽然对circRNAs氨基酸某种程度的扫描以及AGO2 PAR-CLIP统计数据的系统对性阐明了绝大多数circRNAs不能为广泛相辅相成到miRNA，仍然有其他例次子如circSry，circHIPK，circFOXO3，circITCH，circBIRC6，它们都能与miRNA相辅相成发挥新类似性起到。利用AGO-RIP和CLIP技术对扫描是不是意味著circRNAs与miRNA除此外或多或少相互起到极度关一共价键。构建敲击除和敲击高于蛋白系深入研究circRNAs与推实有的miRNA新功能和准确度除此外相互起到也很不可或缺。2.4 circRNAs的中文2017年，几个课题组媒纤报道了circRNAs可被中文。引人注目的是，可中文circRNAs亦然采用与细菌DNA或多或少的起始密码次子，而暂时中止密码次子则是演化温和的且特异于外侧ORF。该深入研究还猜测circRNAs是被膜衍生物的核糖纤中文。另外的深入研究猜测起始密码次子中中游的RRACH基序(R=G or A； H=A， C or U) 中都的A被突变时，可以提高circRNAs的中文。由于circRNAs则有5’帽次子，它的中文是帽次子独立国家的。也许，某些中文circRNAs较强形态上核糖纤转到启动子（IRES），尽可能在纤内和纤外以帽次子独立国家的方式也中文。引人注目的是，绝大多数circRNAs预测的是与其细菌DNA字符蛋白质的N外侧地带某种程度一致。这种缩窄了的蛋白质也许会恶性竞争性可抑制其mRNA相接具体联物。酪氨酸因次子Mef2也许就是一个例次子。尽量避免这个应用领域的短时间持续发展，我们预计在几周几年就能看到circRNAs中文以及诱发的荷尔蒙效应的深入研究显现。3. circRNAs 作为迷惑、输送器或栏杆由于circRNAs尽可能长三时除此外意味著以及相辅相成RBPs，它们尽可能作为这些因次子的陷阱或者海上运输次子。在某些但会，circRNAs和细菌DNA蛋白可或多或少或除此外接地进行时起到力。circMbl看痛快就是如此，它也许就隔绝/海上运输了MBL蛋白。这是假实有的circMbl负反馈酪氨酸市中心区的一个混合物。2016年，一项深入研究首次暗指circANRILl可以作为一个蛋白栏杆。在NIH3T3小獭成纤维蛋白，circFOXO3被猜测能分别与p21和CDK2相互起到。circFOXO3-p21-CDK2三元复合体的显现出以致于了CDK2的新功能，随后可抑制了蛋白周期进程。3.1评估circRNAs的纤内新功能深入研究猜测，敲击除CDR1as诱发了中枢神经系统对紊乱具体的行为学变异。cia-cGAS (Cyclic GMP-AMP synthase) 一般来说高强调于长三期培养出来HSC蛋白核中都，尽可能相辅相成cGAS，以致于了它的应答。Cas9敲击除cia-cGAS中游的桥头堡内计有次子中都交叉连续性氨基酸可抑制其强调后，cia-cGAS不足之处小獭中都长三程HSC蛋白群纤减再加，并且升温了造血中都type I酪氨酸的需求量，再次加剧肿瘤蛋白耗竭。当前深入研究暗指，采用表现型字符的shRNA针对交叉实有格通到敲击高于circMbl。当身躯敲击高于circMbl时，加剧DNA强调扭曲，雄性成年期致死，行为不足之处，翅膀手臂及飞行的不足之处。当敲击高于CNS中都的circMbl时，加剧了不正常的神经元新功能。3.2 circRNAs的其他潜在新功能circRNAs也许还有什么样的分次子新功能呢？circRNA较强一个令人着迷的属性即极其比较稳实有并且随时除此外积攒。因此，circRNAs可以作为蛋白酪氨酸历史文化的分次子潜意识分次子或者“飞行记录器”。从微生物学见解来看，长三时除此外意味著的circRNA也许作为较强蛋白字符期望的存储库。前所成年期扭曲或胁迫，这些硬盘也许被中文为酪氨酸胁迫响应或荷尔蒙扭曲的蛋白质。神经元中都circRNA的本底中文也许是比较不可或缺的。因为circRNAs相辅相成与RBPs，如miRNAs一样，circRNAs也许通过相辅相成，呈递和扣留它们的中都转到类似体内区室而发挥起到。越来越促使地尽量避免circRNAs意味著于囊葫芦，它们可以被输送到整个身纤，然后被类似民除此外组织转送，作为路径分次子发挥起到。另外，一个circRNA可以支撑1个或几个中都转分次子（miRNA，RBPs），因此可以作为药物输送扣留的载纤。4.结论与下一代本文研究成果中的基本上的深入研究，暗指circRNAs较强多种新功能，可以作为蛋白栏杆，招募其他多种类型RNA，并且通过相辅相成miRNAs制约酪氨酸呐喊、中文和特异mRNA的分解；中枢神经系统对元中都circRNAs的不对称地理分布暗指了或多或少蛋白除此外输送的也许性；circRNAs尽可能字符从到蛋白，虽然目前为止并不知道绝大多数也许的蛋白的荷尔蒙新功能，很有也许他们会与其细菌DNA时域RNA字符相接蛋白分享某些意志力。由于RNA技术的稳步持续发展，我们预计几周circRNAs应用领域才会有突破性的持续发展。促使的对circRNAs取向，海上运输，活蛋白内分解，值得注意的circRNAs相互起到组，以及单蛋白图谱的了解都将在这个应用领域取得进步。原始出处：Patop IL1, Wüst S1, Kadener S1.Past, present, and future of circRNAs.EMBO J. 2019 Aug 15;38(16):e100836. doi: 10.15252/embj.2018100836. Epub 2019 Jul 25.